伍思培，广东省人民肺癌转化医学重点实验室副研究员，博士毕业于南方医科大学肿瘤学专业，美国Fox Chase Cancer Center（FCCC）访问学者（2012-2013）。主要从事肺癌免疫治疗，肿瘤免疫反应机制研究，擅长人源化肺癌免疫反应动物模型构建，分子生物学研究实验，近年来获得的基金：国家自然基金面上项目，项目号：81972200，广州市科技计划项目，项目号：201904010028，广东省科技创新战略专项基金面上项目，项目号：2019A1515011937，共计85万元、发表的SCI文章10篇，其中科院二区及以上3篇。

1. 引言

靶向作用于免疫哨卡点抑制剂（immune checkpoint inhibitor）的PD-1单克隆抗体已经在肺癌，黑色素瘤，肾癌等多种实体瘤中被证实有切确的疗效。但临床上PD-1单克隆的疗效预测是一大难点，即使是肿瘤细胞PD-1的配体PD-L1的表达阳性率≥50%的患者中，PD-1的疗效也仅有50%左右。那么PD-1单克隆抗体的疗效又会受到哪些因素的影响呢？是有待解决的科学问题。我们的研究从肺癌肿瘤微环境入手，深入剖析肺癌肿瘤微环境的PD-L1/PD-1表达阳性免疫T细胞亚群与PD-1单克隆抗体疗效的关系；挖掘出肿瘤浸润T细胞影响PD-1单克隆疗效的内部机制。

2. 结果展示 

1）通过对血液，正常肺组织以及非小细胞肺癌的多色免疫荧光标记。我们发现了PD-L1阳性T细胞在肿瘤微环境中的分布规律。为了进一步验证PD-L1在非小细胞肺癌肿瘤细胞和肿瘤浸润T细胞中的表达状况，我们通过免疫共沉淀实验（IHC）法进行观察分析。并发现PD-L1阳性肿瘤浸润T细胞的分布在肿瘤组织中较高，而且与PD-1阳性的肿瘤浸润T细胞的分布有正相关关系。因此，PD-L1阳性T细胞的在非小细胞肺癌中的浸润是否和PD-1单抗的预后有关，是我们有待解决的问题。

2）那么这种PD-L1阳性的肿瘤浸润T细胞是否与非小细胞肺癌肿瘤微环境的免疫状态有关系呢？我们通过进一步分析PD-L1阳性肿瘤浸润T细胞与CD8+免疫活化T细胞的关系；我们发现PD-L1阳性的肿瘤浸润T细胞与免疫耗竭型CD8+T细胞（PD-1+CD8+T）呈正相关关系；与免疫活化型CD8+T细胞呈负相关关系。我们的结果提示我们PD-L1阳性肿瘤细胞与CD8+T细胞的免疫状态有关。

3）为了进一步阐明PD-L1阳性肿瘤浸润T细胞对PD-1单克隆抗体免疫治疗的影响作用，我们构建了非小细胞肺癌免疫/肿瘤细胞免疫反应细胞模型。我们的实验中选取了PD-L1高表达以及PD-L1低表达的非小细胞肺癌细胞株。通过将PD-L1表达不同的细胞与不同PD-L1+，PD-1+T细胞比例的肿瘤浸润T细胞混合培养；实验中我们发现PD-L1+/PD-1+双阳性的T细胞无论是在PD-L1高表达，还是PD-L1低表达组中均表现出对PD-1单克隆抗体的较好疗效反应。为了在临床治疗中验证我们的结果，我们对接受PD-1单克隆抗体的患者根据不同的PD-L1+与PD-1+肿瘤浸润T细胞含量进行免疫学分型。并进一步分析不同免疫亚型组的患者对PD-1单克隆抗体的疗效反应。我们的结果发现PD-L1+/PD-1+肿瘤浸润T细胞双阳性的分组患者对PD-1单克隆抗体的疗效最好。

3. 研究思路

4. 总结

本文的研究思路是来自于临床中PD-1单克隆抗体免疫治疗存在的实际问题：单独检测PD-L1在肿瘤细胞中的表达难以预测PD-1单克隆抗体的疗效。为了解决这一科学问题，本文首先通过构建免疫细胞/肿瘤细胞共培养模型，初步探索PD-L1/PD-1表达阳性的T细胞在PD-1单克隆抗体免疫治疗中的意义。并进一步根据PD-L1以及PD-1在肿瘤浸润T细胞的含量，对非小细胞肺癌患者进行免疫分型。在临床中验证了PD-L1表达阳性的肿瘤浸润T细胞也是非常重要的疗效预测指标。我们的研究为PD-1单克隆抗体免疫治疗的疗效预测提供了新的思路。

原文链接：https://www.jto.org/article/S1556-0864(17)33102-7/fulltext（Journal of Thoracic Oncology, IF=13.357）

特别鸣谢：

本文转自：GD省医公共实验室公众号

欢迎投稿：MLCMGD@163.com